[求救] transwell的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (黑)時間14年前 (2011/12/11 17:46), 編輯推噓0(003)
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各位版友好 小弟想請問transwell使用上的問題 小弟最近在進行macrophage migration的實驗 使用的是corning 24-well 8-um的transwell 首先在上層seeding細胞 待貼附後換serum free medium(200 ul)並且在下層加入含有M-CSF的medium(350 ul) 反應2 hours(也試過24 hours)後刮去上層細胞(用棉花棒) 接著固定染色並割下membrane做鏡檢 然而我發現下層未加入M-CSF的negative control也有大量的細胞... 目前發現可能的原因應該是下層的液體只要稍微蓋過上層的membrane就會滲過去 這樣是正常的嗎 因為如此不就失去原本濃度梯度的效果了 不知是否因為這樣導致實驗失敗 P.S 有確認過下層的液體並沒有比上層well高 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.133.84.58

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1.pore size 有點大 2.靜至細胞會有重力作用,我自己用
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用5um,多數細胞都卡在pore,下層機呼啥細胞,給你參考
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12/12 05:00, , 3F
下層幾乎沒啥細胞
12/12 05:00, 3F
文章代碼(AID): #1Ev7lwaq (Biotech)
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