[求救] 神經組織石蠟切片
大家好
我最近都在做坐骨神經組織的石蠟切片
但是一直遇到一個很大的問題
就是無法保持組織型態的完整
切出來每一片幾乎不是變形就是有破洞
我看過一些教材的切片也是有些微的破碎或變形
如果稍微變形或破碎都還可以接受
但我切出來的實在都太嚴重
整個nerve bundle會跟perineurium分離
nerve fiber也常常會分開或是像被什麼拉長一樣的變形
我目前用的方法如下：
sample切成3~5mm小段之後固定
固定液：Paraformaldehyde 24 hrs
後固定兼染myelin：Osmium Tetroxide 1 hr
梯度酒精脫水與置換包埋按一般步驟
(酒精50%→→→100%，酒精與xylene混合，xylene，xylene與石蠟混合，石蠟)
染色是用HE
我在想是否是固定太久或是固定不足
還是石蠟置換的不完全造成的@@
切片的時候勤於換刀是有稍微好一點
但也只有稍微@@
石蠟切片這部份
我之前切過軟硬骨、卵巢、皮膚都沒有太大的問題
唯獨這次神經真是讓我嚐到苦頭
感覺很挫敗...Orz
我知道改冷切或許是個好方法
但礙於現狀無法改用冷切..@@
不知道各位有沒有什麼建議可以改善這種狀況?
謝謝～
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.148.117
推
12/26 22:10, , 1F
12/26 22:10, 1F
→
12/26 23:25, , 2F
12/26 23:25, 2F
→
12/26 23:28, , 3F
12/26 23:28, 3F
推
12/27 00:07, , 4F
12/27 00:07, 4F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
106
246