[求救] 收lysate的問題
小弟用的是MCF-7 cell 然後加藥收pellet的時後一直慘劇
我的收法是 (使用6cm dish)
浮的全收+trypsin打下來的全收
(後來連PBS wash)也收
如果說是藥劑影響cell的存活
照理來說應該會有一個趨勢
(藥越多 pellet越多 或者反之等等)
可是就是每管都不一樣Q_Q"
真不知道我收lysate的時後有什麼問題
或者加藥等等處裡有沒有什麼要注意的
還是說seeding的量不equal?
我seeding都是先把細胞移到tube裡面
然後數完 每次種一盤前後都會搖晃tube
然後也等他貼盤一天後吸掉MEDIUM在加有藥的MEDIUM下去
不知到哪邊得注意阿~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 118.170.154.113
※ 編輯: raylie9093 來自: 118.170.154.113 (04/19 22:57)
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細胞有死掉 可是的確好像每個濃度死不太一樣(飄起來的像屑屑的嗎?)
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我是要看ezh2 我不是用PELLET判斷~是每次收的pellet都不euqal 也沒有一個趨勢
就一直多多少少不穩定
※ 編輯: raylie9093 來自: 118.170.154.113 (04/19 23:45)
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濃度是和老闆討論的
應該是說 不管怎樣 PELLET的量也不會一個明顯多 一個少到幾乎沒有 或者少到誇張吧
而且少的是untreat和treat的最高量 中間濃度pellet都很足夠 RIPA加很多XD
我就覺得很怪Q_Q
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我是要看protein的表現量沒錯
可是怎麼會收到就說 pellet會多多少少隨藥濟濃度不一是很正常的嗎?
※ 編輯: raylie9093 來自: 118.170.154.113 (04/20 21:00)
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我處理五個濃度 反而最高濃度處理和 UNTREAT這兩個pellet都少得很誇張
滿度我有看一下 主要是看貼盤情況 也都貼了
可是就是滿度來說 我不知道怎樣看才準? 因為視野下看就感覺都差不多QQ
※ 編輯: raylie9093 來自: 118.170.154.113 (04/20 23:14)
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