[求救] Gel elution測O.D

看板Biotech (生命科學)作者 (JPG)時間14年前 (2012/05/04 14:46), 編輯推噓3(307)
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請問一下~~ 一般情況在做完Gel elution後 會去測O.D260/280比值嗎? 還是只看濃度就好??? 因為我最近要做ligation 我將我的plasmid先以restriction enzyme切過後 跑膠→Gel elution→做ligation 我是用Qiagen的Gel elution kit 但我發現elution後測O.D 260/280 ratio都超過2 最高還有2X出現 濃度大概都只有30ng/ul左右(跑膠確定有band) 之前用Viogene時 測出來ratio大概都是1.8左右 我想問有沒有人也遇過類似的狀況? 目前做了2批都一樣 感謝> <" -- ▲▲ ◣東方project系列 > < ◣ ◢  ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ◤▎ ◥◣持續推廣ing | | ██> 少女受虐中... ψ涼宮 域 gbwind ◢ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.48.124

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有測過,不過你是用水還是elution buffer把DNA elute?
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因為elution buffer有鹽會干擾OD值,但我覺得對ligate
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影響還好,真正重點還是在V/I ratio跟接點的條件
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用Kit附的elution buffer~
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我用elution buffer測都約1.6-1.4這種數值 不過還是接
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得進去
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會測...但是V牌的member粹屑掉進sample裡會造成假陽性
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也就是吸光質數據不錯 但跑膠band不好看 不亮或拖尾
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作後續實驗有出過狀況 Q牌相對來說好非常多 回收量多
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band也美 但是價錢也很夭壽的美 用多了老闆會靠腰
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文章代碼(AID): #1FetimtW (Biotech)
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