[求救] ELISA讀值都一樣 該怎麼辦?

看板Biotech (生命科學)作者 (威廉大帝)時間14年前 (2012/05/14 12:10), 編輯推噓0(006)
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最近在做ELISA的測試,plate上面的substrate是自己coating的 因為要測試一抗的濃度定量,所以我coating了10ug/ml的substrate下去, 但是測試的結果不管抗體濃度是4ug/ml一直稀釋到30ng/ml,OD450的值卻一直在差不多0.5 左右…… 這樣是代表我的binding沒有這麼好嗎? 我是否要再增加coating的量呢? 但是OD450卻又沒有飽和,很難解釋的結果…… 想要請問一下各位的意見 !!! 感謝!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.202.80.48

05/14 12:41, , 1F
二抗會不會有non-specific binding??
05/14 12:41, 1F

05/14 13:13, , 2F
應該不會,因為二抗是anti-human的 (一抗是human)
05/14 13:13, 2F

05/14 13:37, , 3F
有沒有blocking呢, 留一孔不要coating的一併試看看
05/14 13:37, 3F

05/14 14:16, , 4F
有blocking, 是在測試某種抗體藥物的濃度測定方法~
05/14 14:16, 4F

05/14 15:12, , 5F
放一孔不加一抗直接加二抗確認一下
05/14 15:12, 5F

05/14 16:05, , 6F
OK 感謝各位~ 正在測試中! :)
05/14 16:05, 6F
文章代碼(AID): #1Fi8MTNJ (Biotech)
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