[求救] T7 RNA Polymerase純化
最近在clone T7 RNA polymerase,目前是先將此基因接在pUC系統的載體上,
之後是預計轉型到DH5alpha中表現。那我之後改怎麼純化呢?
還是有其他神人們也純化過此酵素,用的是其他方法?
可不可以告訴我一下大略的方法呢?
原本是將它接在pET20b上之後要轉型到BL21(DE3),因為它有His taq之後較好純化
但是礙於BL21(DE3)上本身已有T7 RNA polymerase怕會影響到,所以沒有繼續做下去,
不知道這方法可不可行...
請各位有純化過此酵素的大大們幫幫我吧!!!!
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