[方法] 冷凍切片 組織處理

看板Biotech (生命科學)作者 (嗚哈哈)時間13年前 (2012/10/06 23:53), 編輯推噓3(302)
留言5則, 4人參與, 最新討論串1/1
各位先進!!!!! 想請問大家 欲冷凍切片的組織取下後會固定嗎? 我是打算用4%PFA固定但 是似乎會對日後染色有所影響 雖說不是每隻抗體都會影響,但保守考量之下 想請問其他固定方法 acetone是否可以作為固定液 在使用上需要注意什麼? 另外 常看到會有蔗糖脫水的步驟 想請問這步驟是必需的嗎?若不脫水會造成什麼樣的影響? 因為實驗室一些人似乎也沒有做這個動作 麻煩各位!!謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 111.242.80.80

10/07 08:54, , 1F
PFA對免疫染色的影響比較小,別用acetone
10/07 08:54, 1F

10/07 09:48, , 2F
推樓上~目前對染色影響較小的還是PFA~
10/07 09:48, 2F

10/07 10:57, , 3F
不脫水冷凍後組織中有冰晶,切片會坑坑洞洞
10/07 10:57, 3F

10/07 15:07, , 4F
要用PFA固定的話, 何不做石蠟切片呢 ^^
10/07 15:07, 4F
速度比較快,目前我用的是臘切,我的認知石蠟和冷凍切片的抗原完整度還是有差?並且在 paper上我的sample大多還是以冷切為主 所以想試試看冷切

10/07 19:34, , 5F
石蠟要加熱,有些抗體會認不到...
10/07 19:34, 5F
謝謝各位!!!!!!! ※ 編輯: caesar0926 來自: 111.242.80.80 (10/08 00:09)
文章代碼(AID): #1GS5Fa8g (Biotech)
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