[求救] 請問有人試過將IHC重新strip後染色的嘛

看板Biotech (生命科學)作者 (等待)時間13年前 (2012/10/18 18:24), 編輯推噓1(102)
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聽學長說IHC的片子染完後可再strip,重新染Ab 上網看到其中一篇paper用了好幾種strip buffer,分別去比較他們的效果 Antibody elution method for multiple immunohistochemistry on primary antibodies raised in the same species and of the same subtype. J Histochem Cytochem. 2009 Jun;57(6):567-75. 當中利用Glycine-SDS pH=2 50度C incubate 30 mins效果最好,所以想說試試看 不過現在遇到一個問題 當初用的是水溶性封片膠,所以把片子放到水裡過沒多久蓋玻片順利脫落 但因先前技術不好,封片封太厚,導致蓋玻片掉落後,還是明顯看到一層膠在上面 想說再繼續泡著是不是可以讓膠溶掉,但那層膠還是存在 也試著放在37度C incubator,但效果也不好 主要是擔心那層膠的存在會影響後續的染色? 還是說當我在strip的過程中,因為buffer pH=2的關係,所以那層膠也可以跟著被溶掉呢? 不知道有沒有板友做過類似的實驗,可以提供一些經驗嗎? 感謝大家了~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.51.17

10/18 18:43, , 1F
我用的封片膠是Dako Faramount Aqueous mounting medium
10/18 18:43, 1F

10/19 15:04, , 2F
還要strip你就別封片了,直接PBS看完拍完就可以繼續下一個
10/19 15:04, 2F

10/26 16:41, , 3F
strip完後 要再染的到protein 真的是機會機會了!只能try~
10/26 16:41, 3F
文章代碼(AID): #1GVzZHsw (Biotech)
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