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[求救] TA cloning 求救

看板Biotech (生命科學)作者 (玩具)時間13年前 (2012/12/19 18:22), 編輯推噓8(8推 0噓 8→)
留言16則, 13人參與, 最新討論串1/1
各位高手 請問一下 最近實驗在做TA cloning 用TA cloning vector kit (RBC) 2.7K 接進去的insert 約 1K 藍白篩 protocol上寫選藍色的繼續做 長出了17顆藍色 全挑出來抽質體 質體電泳圖 http://ppt.cc/YK8Q 拿kit 附的 M13 F+R PCR出來沒有東西 接著拿當初 insert設計的primer 有兩支跑出來 但不明顯 PCR電泳圖 http://ppt.cc/fYie 非常奇怪 上面都會有兩條band 而拿兩支有P出來的 作酵素切 不管一刀還是兩刀 都只有上面那兩條band 請問高手們 到底發生了什麼事 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.59.89.23
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12/19 18:38, , 1F
選藍色感覺好妙 ... 我沒有聽過這樣的耶 ..
12/19 18:38, 1F
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12/19 18:43, , 2F
我也是，我馬上就去找網路上RBC TA vector的圖
12/19 18:43, 2F
protocol 就說 the blue color will continue to develop. 我當初也很納悶 只是他這樣說 我也只能做做看了 ※ 編輯: jkq 來自: 210.59.89.37 (12/19 19:17)
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12/19 21:38, , 3F
上面這句話只是說藍色會漸漸變深吧 你還是應該挑白的去做
12/19 21:38, 3F
推
12/19 22:03, , 4F
他沒有叫你挑藍色的呀？
12/19 22:03, 4F
所以上面那句話不是說藍色可以繼續做下去的意思啊 我決定看了你們的疑問 我還是重做 挑白色的 ※ 編輯: jkq 來自: 221.120.6.54 (12/19 22:35) ※ 編輯: jkq 來自: 221.120.6.119 (12/19 22:42)
推
12/19 23:32, , 5F
-.,- lacZ 哭哭中
12/19 23:32, 5F
推
12/19 23:45, , 6F
你做一組沒有加insert的就會知道為什麼大家會這樣問了
12/19 23:45, 6F
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12/20 00:18, , 7F
挑白的加1,另外你可以放冰箱一短時間再挑, 藍的會更明顯
12/20 00:18, 7F
推
12/20 00:23, , 8F
TA挑藍色的..我第一次聽過= = 沒有先問過做過的人嗎?
12/20 00:23, 8F
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12/20 01:20, , 9F
如果不是實驗室第一次碰或沒有學長姊,那就可能被排擠了
12/20 01:20, 9F
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12/20 01:32, , 10F
請問你有沒有先了解藍白篩的原理呢？上網查一查吧:)
12/20 01:32, 10F
推
12/20 09:15, , 11F
如果盤子沒放很久,不用重做,快把白的挑出來吧
12/20 09:15, 11F
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12/20 09:15, , 12F
白的放太久也會變藍就沒得挑了
12/20 09:15, 12F
推
12/20 11:34, , 13F
licat正解
12/20 11:34, 13F
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12/21 15:13, , 14F
沒聽過藍白篩選藍色的…
12/21 15:13, 14F
推
12/22 23:43, , 15F
白的加1,沒聽過藍白篩選藍色的…
12/22 23:43, 15F
推
12/23 20:49, , 16F
M13應該都P的出東西，無論有沒有接上才是，只是長度有差
12/23 20:49, 16F
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