[求救] active caspase-6 偵測
各位版友好,
想請問一下有沒有人用過 cell signaling他們家的cleaved caspase-6 (#9761)
http://tinyurl.com/b76yf56,先前實驗發現我的蛋白質(可能是caspase-6的受質),
有被切的現象,而大小也正好事caspase-6的切位。因此想直接壓cleaved caspase-6
的訊號。但在十幾kD的位子沒看到我預期的訊號,且backgroud頗髒。
我的實驗步驟如下:
1、實驗的sample (原濃度為1 ug/ul)利用蛋白質沉澱方式濃縮三倍(理論濃度為3 ug/ul)
2、每個lane loading 60 ug的蛋白質。
3、跑12%的gel。
4、Blocking with 3% BSA 1小時。
5、Cleaved caspase-6 (1:1000) O/N.
6、Anti-rabbit (1:2000) 1小時。
請問有什麼地方可以改進的嗎…? 謝謝!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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