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[求救] 肝臟冷凍切片前處理灌流

看板Biotech (生命科學)作者 (劉SIR)時間12年前 (2013/08/01 00:45), 編輯推噓6(6推 0噓 6→)
留言12則, 4人參與, 最新討論串1/1
想要請問板上有做過mice小鼠的肝臟灌流實驗的大家 mice的組織不如rat來的大 實驗目的是要為了做冷凍切片染ORO(lipid)的檢體包埋前處理 打算在小鼠犧牲後 先用PBS灌流肝臟(替換血液)再用4%paraformaldhyde固定O/N >>surcose脫水>>OCT包埋>>切片 所以來到版上詢問 怎麼做肝臟灌流>"<?懇請有做過的大家幫忙提供方法 是所謂的浸泡、亦或是dropper大量沖洗嗎??懇請賜教~~感恩^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.58
推
08/01 07:06, , 1F
準備3mlPBS，右心耳(大靜脈處)稍微剪開，PBS針頭從心尖注入
08/01 07:06, 1F
推
08/01 09:52, , 2F
同上，不過3ml不太夠，可用50ml針筒裝PBS or PA，依樓上的
08/01 09:52, 2F
→
08/01 09:53, , 3F
方式，將裝有蝴蝶針（anyway,夠細就行）插到心間，再剪開
08/01 09:53, 3F
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08/01 09:54, , 4F
右心房，此時血液會大量流出，但心臟仍持續跳動，利用循環
08/01 09:54, 4F
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08/01 09:55, , 5F
將血液帶出，當流出的液體變成透明（PBS）後，再置換成PA
08/01 09:55, 5F
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08/01 09:56, , 6F
，因血液已經流光，故血管不會塞住，可以將PA送往全身做前
08/01 09:56, 6F
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08/01 09:57, , 7F
固定，可適時按壓臟器確認，變硬就可將所需器官組織取下
08/01 09:57, 7F
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08/01 09:58, , 8F
做後續處理，當然，按照你自己寫的取下固定也行啦......
08/01 09:58, 8F
推
08/01 11:29, , 9F
(sorry手誤)我原本要打30ml，可以多準備些啦，邊打邊觀察
08/01 11:29, 9F
推
08/01 19:27, , 10F
不一定要到變硬，看到目標臟器或附近肌肉抽猝就差不多了
08/01 19:27, 10F
推
08/02 09:02, , 11F
以前老師說灌到眼睛的紅色不見
08/02 09:02, 11F
推
08/02 13:56, , 12F
只要PBS把血液取代就會讓眼睛的紅色不見，這不代表灌好了
08/02 13:56, 12F
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