[求救] 大鼠體外心臟採血如何避免溶血?
實驗需要大鼠體外心臟採血,目前碰到的困難是溶血的情況非常嚴重,
抽十管離心後大概七八管都嚴重溶血,收集的血清也因此無法作後續的實驗,
想請教有經驗的板友有什麼方法可以改善?
以下是抽血的步驟:
1. 約300g SD rat先以chloral hydrate i.p 麻醉 腹部朝上平躺
2. 左手確認心臟位置後,右手使用含有0.1M EDTA 的10 cc針筒接上18G針頭
約45度角刺入,針頭有回血後慢慢回抽。(量至少都有5cc以上)
3. 針頭拔掉,將血液沿管壁注入採血管裡,放入離心機,以3000 rpm 15min條
件離心。
想要取得的血液須有一定的量,所以尾靜脈覺得不適合,雖然也有下腔靜脈可以
抽但實驗關係想盡可能避免開腹部,目前體外心臟採血抽到的想要的量,但卡在
溶血嚴重,請問是否因為步驟上的問題或有其他方法可以避免嚴重的溶血?
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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