PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] 以LPS刺激RAW264.7的劑量

看板Biotech (生命科學)作者 (修)時間13年前 (2013/02/17 22:25), 編輯推噓4(4推 0噓 8→)
留言12則, 5人參與, 最新討論串1/1
請問大家在以LPS刺激RAW264.7時 LPS都下多少呢? 我要測刺激後上清中cytokine的分泌量 之前我用實驗室舊的raw 養在10%FBS+DMEM中 下LPS 160ng/ml, 刺激24hr 測到TNF alpha 有3000多pg/ml IL-6只有30多pg/ml 後來向食工所買了新的raw, 同樣以160ng/ml刺激24hr 測到TNF alpha有5000多pg/ml 但IL-6只有不到10pg 囧 也測不到IL-1b, IL-12 是這樣的劑量還不足以刺激他嗎?! 查了文獻發現不少人LPS下到micro等級,當然也有只用100ng的 想問問看大家意見. 謝謝 (_ _) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 175.180.181.115
→
02/18 10:03, , 1F
細胞數? 96-well??
02/18 10:03, 1F
→
02/18 12:36, , 2F
種在96well 每個2x10^4 100ul
02/18 12:36, 2F
推
02/18 17:13, , 3F
LPS濃度夠 試試細胞數2x10^5吧~~
02/18 17:13, 3F
→
02/18 21:59, , 4F
最後濃度是2x10^5沒錯 上面打的是每well有的細胞數
02/18 21:59, 4F
→
02/18 22:00, , 5F
意思是LPS下到160ng/ml應該就能刺激嗎?謝謝
02/18 22:00, 5F
推
02/19 06:08, , 6F
拍謝 沒寫清楚 我是說每well種2x10^5的細胞 ~~
02/19 06:08, 6F
推
02/21 19:25, , 7F
LPS是SIGMA的吧? 不同菌株有差 原廠MSDS都有建議劑量
02/21 19:25, 7F
→
02/21 19:26, , 8F
你如果用055那個 濃度可以很低 買它細胞專用的那個
02/21 19:26, 8F
→
02/21 19:28, , 9F
原廠建議是1ug 建議你先看看手上的lps的來源
02/21 19:28, 9F
→
02/21 19:31, , 10F
細胞數這樣很OK 拉到10^5 如果有先放24H的話會太滿
02/21 19:31, 10F
推
02/21 19:50, , 11F
working 1ug/ml
02/21 19:50, 11F
→
02/21 21:40, , 12F
瞭解,謝謝樓上幾位!!:)
02/21 21:40, 12F
‣ 更多 greenpeace29 的文章
文章代碼(AID): #1H8EXAqi (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 greenpeace29 的文章
文章代碼(AID): #1H8EXAqi (Biotech)