[求救] primary culture cell 不太貼?

看板Biotech (生命科學)作者 (小晴)時間12年前 (2013/04/04 22:32), 編輯推噓7(7010)
留言17則, 8人參與, 最新討論串1/1
目前是從skin中分離出keratinocyte跟fibroblast 用的是trypsin跟collagenase 但是處理過分離出來的細胞都不會攤開 都還是一顆一顆圓圓的 會有些沉在底部 可能有稍微黏住 因為我換medium後還是會有剩下的細胞 搖晃dish也不會所有的細胞都一起晃 請問有沒有人有經驗? 這樣有養成功嗎? 我要繼續等他貼嗎? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 1.173.164.209

04/04 23:04, , 1F
collagenase有去除掉嗎? 要去除掉細胞才會貼
04/04 23:04, 1F

04/05 00:09, , 2F
有用中和enzyme的一種buffer洗過了
04/05 00:09, 2F

04/05 01:39, , 3F
有沒有說需要coating 什麼東西啊
04/05 01:39, 3F

04/05 05:21, , 4F
dish coating呢?
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04/05 12:28, , 5F
Dish先coating poly-Lys ?
04/05 12:28, 5F

04/05 19:58, , 6F
protocol上沒特別說明 請問要coating的話要怎麼選擇?
04/05 19:58, 6F

04/06 19:59, , 7F
可以用特別加強貼附的Dish coring、BD、Greniner 都有呀!
04/06 19:59, 7F

04/08 09:30, , 8F
medium的配方呢?我養都用一般culture dish,但之前未抓到
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04/08 09:31, , 9F
fibroblast所需營養時也都不太貼
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04/08 15:02, , 10F
我有換corning的CellBind dish養也是差不多 medium用
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04/08 15:03, , 11F
fibroblast: HG DMEM+10%FBS(+sodium pyruvate)
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04/08 15:05, , 12F
keratinocyte:用gibco出的一種專門養keratinocyte SFM
04/08 15:05, 12F

04/08 15:32, , 13F
我之前也有遇到相同問題 後來coating collagen可以改善
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04/08 15:34, , 14F
貼的問題 不過keratinocyte還是只能長十幾天 卡關中
04/08 15:34, 14F

04/08 15:35, , 15F
我是收mouse的 用dispase
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04/08 17:04, , 16F
C大握手! 一起加油!
04/08 17:04, 16F

04/11 12:44, , 17F
fibroblast的話 放久一點 +F12 or 20%FBS
04/11 12:44, 17F
文章代碼(AID): #1HNOy05Q (Biotech)
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