[求救] 請教comet assay相關問題
各位好:
這是我第一次做 comet assay
我們家有買 TREVIGEN 的 kit
所以分別有做了 Alkline/Neutrl 二種
有按照他們家的 protocol 做
但我們家沒有專門跑 comet assay 的電泳槽
只能用一般跑gel的電泳槽跑
請問:
(1) 跑gel的條件是使用1x TBE,
18 V/cm,跑30分鐘
[利用外接電源供應器(MP-250V),1 V/cm,電泳槽 - → + 為18cm]
但是電流就沒像說明書上達到~220mA
這樣跑出來的是沒問題的嗎? 還是需要借專門跑comet assay的電泳槽?
(2) 請問利用這套kit做需要用蓋玻片壓嗎?(一開始將膠滴在玻片上的時候)
而且最後在37度烘箱烘乾之後,需要再做額外的處理嗎?
需要再加mounting medium在封起來嗎?
因為利用螢光顯微鏡拍照的時候很常對不到焦
請問有什麼解決的方法嗎?
請有做過的大大指導一下
感恩^^
--
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