[求救] 實驗新手求問序列正反接問題
今天被老師問了一個問題
如果我今天做了blunt end的cloning,
要怎麼知道insert是正接還是反接?
我想到的是(1)拿去送定序,再alignment比對
可是定序只要定預計插進去的CDS區就好嗎?還是全部insert(primer全長)都要比對?
(2)拿去切酵素,切完酵素之後跑膠看insert掉下來的位置?
(3)定序定整個cloning(感覺不可行..)
懇請高手賜教謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.200
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應該只有序列不同嗎?(猜測..)
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意思是我可以將cloning抽出來後以forward plasmid primer + reverse insert primer
定序確認嗎?
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可是可以被酵素切斷不就只是證明我有clone成功,
還是不知道他是正接反接?
※ 編輯: LintongBis 來自: 175.181.110.202 (05/09 23:06)
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