[求救] 酵素動力學數值分析問題

看板Biotech (生命科學)作者 (bji4h6)時間12年前 (2013/06/07 17:26), 編輯推噓0(0020)
留言20則, 2人參與, 最新討論串1/1
先感謝各位大大解答。 我最近再測酵素動力學時 算出來的Vmax 達7百多mM/min Km為 2百左右mM 這樣的數值大到有點嚇到我覺得我實驗是否有問題...... 酵素的比活性為39 U/ML 請問各位,Vmax 及Km 的數字,有一定的範圍嗎? 再請問如果酵素有稀釋的話,在做計算時,需要把稀釋因子乘回去嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.118.160.191

06/07 22:41, , 1F
比活性的單位應該是U/mg,如果你在測活性的時後基質有用
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06/07 22:42, , 2F
到兩倍Km的話(飽和),Vmax換算出的Kcat應該跟比活性很像
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06/07 22:44, , 3F
各種不同的酵素動力學數值差很多,參考其它相似度高的酵
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的酵素看看哩
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※ 編輯: muffinex 來自: 140.118.160.191 (06/08 18:42)

06/08 19:50, , 5F
動力學的話不同濃度的基質都要用同樣的最終酵素濃度來做
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06/08 19:53, , 6F
這樣才能將計算Kcat=Vmax/[enzyme] 所以有稀釋放同體積
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就是放進去的濃度變少
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對了如果要跟別人比的時後要注意單位,常常在跟老闆討論
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為什麼別人的數據都那麼漂亮的時後仔細一看才發現單位有
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動手腳,有時後也可以用別人測活性的數據反算動力學有沒
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有異常,有時後明明相似的酵素動力學卻天差地遠....
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小妹資質駑鈍,我都有用相同稀釋濃度的酵素作動力學實驗
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但數據換算出來的Vmax跟Km要不要把稀釋倍率考慮進去呢?
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不需要哩 酵素加的少只是慢一點到平衡不會影響反應特性
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06/08 20:12, , 15F
感謝!!!
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06/11 18:27, , 16F
後來詢問老師,發現Km不會隨酵素濃度變化影響,為固定值
06/11 18:27, 16F
muffinex:只有Vmax會有變化 06/11 18:28 ※ 編輯: muffinex 來自: 140.118.160.191 (06/11 18:30)

06/11 22:41, , 17F
Vmax應該是基質飽和的速度,酵素放濃還是一樣的最高速度
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06/11 22:43, , 18F
應該是指Vmax/酵素濃度出來的Kcat會有變化,通常Vmax不都
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06/11 22:43, , 19F
要再換算成Kcat?
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06/11 22:45, , 20F
我也來去找老闆確認一下好了XD 搞不好是我記錯了也不一定
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文章代碼(AID): #1HiQTAix (Biotech)
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