[求救] 關於萃取蛋白時利用Sephadex去鹽的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (薩斯德)時間12年前 (2013/06/09 02:34), 編輯推噓0(002)
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最近在進行植物蛋白的萃取 要來計算酵素動力學 之前有學姐以水稻為材料進行相同的實驗 而小弟我則是在材料部分換成了一個禾本科雜草 而其餘皆相同 但在粗蛋白萃取出來後 要過Sephadex G-25純化時卻碰到了一個問題 (我過的Sephadex是買粉末自行填充的) 蛋白萃取液卡在Sephadex的頂部而下不去 曾經試過調整Sephadex的濃度 也試過增加萃取液的量 但還是不行 不是過不去 就是過得很慢 2ml的萃取液要等超過一小時才有八成下去 不知道問題是出在哪裡 有思考過可能在材料一開始取的量雖然與水稻相同 但此雜草可能在萃取過程中有較多雜質產生 而導致無法通過Sephadex 而目標蛋白部分雖然在材料上與學姐所使用的水稻不同 但蛋白的分子量是一樣的 想請教有無板友碰過類似情況 或是有甚麼能夠幫助我的想法 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.230.71.47

06/09 04:48, , 1F
粗抽液有沒有先過一次 .45 或 .22 的小飛碟 可能會有幫助
06/09 04:48, 1F

06/09 04:49, , 2F
如果還是不行的話就透析吧 一個晚上應該就夠了
06/09 04:49, 2F
文章代碼(AID): #1HitahGj (Biotech)
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