[求救] 關於萃取蛋白時利用Sephadex去鹽的問題
最近在進行植物蛋白的萃取 要來計算酵素動力學
之前有學姐以水稻為材料進行相同的實驗
而小弟我則是在材料部分換成了一個禾本科雜草 而其餘皆相同
但在粗蛋白萃取出來後 要過Sephadex G-25純化時卻碰到了一個問題
(我過的Sephadex是買粉末自行填充的)
蛋白萃取液卡在Sephadex的頂部而下不去
曾經試過調整Sephadex的濃度 也試過增加萃取液的量 但還是不行
不是過不去 就是過得很慢 2ml的萃取液要等超過一小時才有八成下去
不知道問題是出在哪裡
有思考過可能在材料一開始取的量雖然與水稻相同
但此雜草可能在萃取過程中有較多雜質產生 而導致無法通過Sephadex
而目標蛋白部分雖然在材料上與學姐所使用的水稻不同 但蛋白的分子量是一樣的
想請教有無板友碰過類似情況 或是有甚麼能夠幫助我的想法 感謝
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