[求救] Plasmid DNA回溶方法?
各位先進版友大家好!
小弟最近在做recombinat DNA,在少量萃取plasmid DNA時,跑出來的電泳圖有點奇怪
,我懷疑是回溶時的問題,想請教各位回溶plasmid DNA時,都是怎麼回溶的?
以下是我萃取plasmid DNA的作法:
我會分別養兩種菌(分別包含不同的plasmid),之後將1cc的菌液放入eppendorf中,離心
,之後加入solution I II III等步驟,加入95酒精後,plasmid DNA析出,再
將有plasmid DNA的eppendorf 倒置於架上,且放置室溫,將其plasmid DNA乾燥。乾燥?
使用ddH2O或者是TE buffer回溶。這裡就是我的問題: plasmid DNA是每一管eppendorf
都有,所以我不曉得要用多少體積的ddH2O或TE buffer回溶(每一管eppendorf)?
ps. 一種plasmid都差不多有六管eppendorf,所以我該將六管中的plasmid全部用30ul
的體積回溶,還是我每一管都用30ul的體積回溶,這樣就有180ul的體積,會不會使DNA
濃度很低呢?
謝謝大家的指導~~
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