[求救] flow分析cell cycle的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (安安~^.^~)時間12年前 (2013/07/20 02:19), 編輯推噓3(3010)
留言13則, 3人參與, 最新討論串1/1
最近用flow跑有treat藥物的癌細胞 (細胞為Huh7) 做了兩次重複的實驗 奇怪的事情就發生在第二次的實驗 第一次用flow分析的時候 cell cycle的分期相當明顯 如圖: http://ppt.cc/lT~q (control組,只有添加1/1000的DMSO) 但是第二次實驗時 cell cycle的S和G2/M phase就不見了!! 如圖: http://ppt.cc/2gif (同為control組) 兩次上機前的處理條件都一樣 80%酒精固定3天 PI final concentration: 20 ug/mL RNase final concentration: 0.2 mg/mL 因為我實在是查不到還有甚麼會使S和G2/M phase消失的可能性 但不知道原因又不太敢再重做一次 所以想請問各位是否有遇過這樣的狀況呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.47.231.116

07/20 12:38, , 1F
是否有散點圖呢?
07/20 12:38, 1F

07/20 14:08, , 2F
有的!! http://ppt.cc/RvBW 這是第一張的dot plot
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07/20 14:08, , 3F
http://ppt.cc/JF2C 這是第二張的~
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07/20 14:13, , 4F
希望各位可以幫我解解惑~~謝謝!!!
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07/21 00:21, , 5F
第二次實驗中,沒有做DNA content的gating嗎?因為到一個程度
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07/21 00:21, , 6F
以上的PI intensity通通歸0是不太合理的,就算是第一次實驗也
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不會如此
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07/21 00:34, , 8F
我也很疑惑!因為兩次的步驟都是一樣的,所以我才想問
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07/21 00:35, , 9F
還有甚麼可能會導致這樣的情況發生???
07/21 00:35, 9F

07/21 15:59, , 10F
請問是收10000 events嗎? 我想或許第二次是有G2 phase
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07/21 15:59, , 11F
只是不明顯
07/21 15:59, 11F

07/26 09:29, , 12F
我兩種cell 都只收5000 events,而且兩次實驗也都
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07/26 09:29, , 13F
收一樣的數目。第二次的G2 phase是甚麼意思呢?
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文章代碼(AID): #1HwOCkiU (Biotech)
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