[求救] 3T3細胞的染色及標定(存活觀察)

看板Biotech (生命科學)作者 (Be better)時間12年前 (2013/07/21 11:58), 編輯推噓5(503)
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版上的前輩大家好: 由於本人念的科系,在生物醫學這一塊的知識幾乎沒有相關 但目前老師出了一個難題, *把我的材料(凝膠)與3T3細胞混合培養後(1、3天),去觀察內部細胞是否存活, 若要觀察的話,細胞必須要先標定在和材料下去培養嗎? 本來有預想使用trypan blue去染細胞,但查一查好像沒有人這樣使用 且養三天不知道染劑會不會被medium沖掉 由於只需要知道細胞活or死,所以我查了許多關於細胞染色方面的文獻 但還是不了解適合我使用的方法為哪一種,所以上來求救。 1.免疫螢光染色法 2.螢光標定 3.細胞轉染 我想請問以上提到三種方式,有相同的嗎?或是有什麼差別呢? 3.單一化學染色法 4.這三種方式所染出來的細胞,都需要在螢光顯微鏡觀察嗎? 比較要說是,我由於只需要知道細胞的死亡和存活(類似細胞計數這樣的概念), 並不需要去分析細胞內部的物質等等,希望能知道一些比較簡便的方式。 非常謝謝大家看完,拜託各位前輩能給我這超級初學者一些建議。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 115.43.43.37 ※ 編輯: princessyoyo 來自: 115.43.43.37 (07/21 12:13)

07/21 17:25, , 1F
凝膠可以digestion嗎?
07/21 17:25, 1F

07/21 20:29, , 2F
crystal violet
07/21 20:29, 2F

07/21 23:08, , 3F
SRB或是MTT這兩種化學染色法都還滿方便的,只要測吸光值
07/21 23:08, 3F

07/22 15:50, , 4F
trypan blue無法在凝膠狀態中染上死細胞,普遍都無法
07/22 15:50, 4F

07/22 15:51, , 5F
若是要將你的gel回融可能又會對細胞造成傷害
07/22 15:51, 5F

07/22 19:19, , 6F
推MTT
07/22 19:19, 6F

07/24 00:26, , 7F
盟基有賣biotium的live/dead assay泡著不用洗可螢光觀察
07/24 00:26, 7F

07/24 12:19, , 8F
crystal violet用肉眼就可以看啦 還可以用家用掃描器存檔
07/24 12:19, 8F
文章代碼(AID): #1HwrnwAs (Biotech)
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