[求救] SDS-PAGE雜問
大家好,我是跑12% gel的SDS-PAGE,
使用大片膠的直立電泳槽,他裡面就有水流的冷卻裝置(設置在4度C)
但每次都常常會容易歪掉(以最旁邊最容易歪,跑一跑會變 / \ 這樣,但中間還算是直的)
因為我sample多,所以一次要loading 13個well,旁邊就很容易斜掉.
目前有在電泳槽外加上有深度的塑膠盒,跑膠時除了內部冷卻還在外圍堆上冰,
且碎冰隨時補充.
出來的成果雖然有直一點但是要細部去看時最旁邊還是斜斜的
我是固定電流前半小時20mA,之後跑到快跳海大約五~六小時設定在40mA,
設過35mA也是斜的.
APS現配,running buffer也是之前才配10X,其他SDS大約兩年,Acrylamide一年多冰4度C
tris 也是冰兩年左右(有調過pH值),不知是不是要換新的?
還有一個問題是band很不sharp,我是用coomassie brilliant blue G-250去染色,
因為之前有爬文說不能放太久,染劑避光保存已經一兩年,是不是該換了呢?
還有爬文到說coomassie brilliant blue R-250的使用,因為我只是跑普通的12%的GEL
如果換成coomassie brilliant blue R-250 band會更sharp嗎?
一堆問題 謝謝大家
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.93.128
※ 編輯: ariel780102 來自: 140.117.93.128 (07/23 19:14)
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