[求救] DNA粗萃取的跑膠結果
我又來求救了QQ
我用了很粗糙的方式萃取了蝦子的DNA
protocol如下
1. 取約一米粒大小的蝦肉至於1.5ml的tube中
2. 加入lysis buffer300 μl，混合均勻之後，靜置一晚(或水浴60度2-3hr)
3. 加入酚-氯仿(1:1混合液)500μl，上下翻轉100回
4. 離心4500rpm,15min
5. 抽取上層澄清液，移至新的tube
6. 重複phenol-chlorform extraction 一遍
7. 加入95%酒精，至1.5ml
8. 冷卻至-20度，至少2hr，最好過夜
9. 離心10000rpm,3min
10. 緩緩倒出酒精，留下pellet
11. 在試管架上倒置tube，晾乾酒精
12. 以300μl TE buffer回溶
上面的lysis buffer就是STE buffer +10% SDS buffer
除此之外完全沒有其他處理
我想請問的是，這樣萃出來的東西
是不是應該包含RNA跟DNA?
(上面步驟都沒有RNAse，RNA應該不會被去掉?
然後
我又拿這樣抽出來的東西去跑0.8%的膠，
會看的到東西跑出來，如圖 http://ppt.cc/8hF5 (最左邊是marker)
下面那些很大坨的是不是RNA?(老師說DNA大到根本跑不出well)
另外，右邊的四個lane在well下端都有個稍微像band的東西，那是甚麼?
感謝大家> <
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.101.103
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