PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] sticky end模版配pfu的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (Epilobium)時間12年前 (2013/08/08 13:43), 編輯推噓1(1推 0噓 7→)
留言8則, 4人參與, 最新討論串1/1
大家好 如果我現在把一條sticky end的產物作為模版 (例如被EcoRI切過) 再拿pfu或其他類似的有proof reading功能的taq進行amplify 理論上我會拿到blunt end的產物 我想問 他成為blunt end 是因為一開始的overhang被pfu taq切掉? 還是因為overhang的另外一股被補起來? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.122.152.136
→
08/08 13:45, , 1F
3' overhang 被切掉，5' 的則是補齊
08/08 13:45, 1F
推
08/08 14:00, , 2F
到底是pfu還是taq ？
08/08 14:00, 2F
→
08/08 14:46, , 3F
pfu
08/08 14:46, 3F
→
08/08 14:49, , 4F
感謝1f的回覆
08/08 14:49, 4F
→
08/08 23:42, , 5F
amplify是指pcr? p過邊都是primer囉
08/08 23:42, 5F
→
08/09 00:01, , 6F
如果只是要把 RE 後的 stick end 補成 blunt，用
08/09 00:01, 6F
→
08/09 00:02, , 7F
DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment 就可以了，
08/09 00:02, 7F
→
08/09 00:03, , 8F
比 Pfu 或其它 proof-reading 的 polymerase 便宜很多
08/09 00:03, 8F
‣ 更多 Onagraceae 的文章
文章代碼(AID): #1I0o_q5u (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 Onagraceae 的文章
文章代碼(AID): #1I0o_q5u (Biotech)