PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] qPCR使用DNase之疑問

看板Biotech (生命科學)作者 (賤仔翔)時間12年前 (2013/09/18 00:03), 編輯推噓1(1推 0噓 9→)
留言10則, 5人參與, 最新討論串1/1
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 如題，現在都在做qpcr，抽完的RNA跑膠測完品質就轉cDNA做qPCR 設計的primer都是跨intron的，那還要加DNase在抽完的RNA嗎? 沒加的話期刊會不接受? 要加的話準則是? 感謝各位高手 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.230.243
→
09/18 00:06, , 1F
雖然有跨intron 但是有genome在的話melting curve
09/18 00:06, 1F
→
09/18 00:07, , 2F
會變不好看嗎? (我們實驗室都會加 照說明書使用)
09/18 00:07, 2F
→
09/18 00:08, , 3F
不會耶@@ 跌得很緊阿
09/18 00:08, 3F
推
09/18 00:24, , 4F
推跑膠看 RNA Quality
09/18 00:24, 4F
→
09/18 00:27, , 5F
樓上是指?
09/18 00:27, 5F
→
09/18 19:54, , 6F
沒加+1, 但雖然跨intron還是要小心有些基因會有pseudogene
09/18 19:54, 6F
→
09/18 19:56, , 7F
因為pseudogene可能會缺少intron, 要是有genomic DNA汙染
09/18 19:56, 7F
→
09/18 19:56, , 8F
就可能在做qPCR時被當作template放大影響實驗
09/18 19:56, 8F
→
09/20 04:12, , 9F
DNase主要是希望RNA更純 且防止genomic DNA汙染
09/20 04:12, 9F
→
09/20 04:12, , 10F
不然抽得好 其實不用加
09/20 04:12, 10F
‣ 更多 naruto200420 的文章
文章代碼(AID): #1IE7qyy6 (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 naruto200420 的文章
文章代碼(AID): #1IE7qyy6 (Biotech)