[求救] mouse heart ischemia-reperfusion injur
我做的是left anterior descending ligation
45min, reperfuse 1 day，用PE-10管子
綁在老鼠的心臟上的時候，
都覺得左心室下方到心間有變白，
可是同樣都是WT，最後用TTC (tetrazolium)染色，結果卻一直不穩定
有時pale region很大很明顯，有時連一點點白色區域都沒有，哀
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19820193
染色的方法大略是follow這一篇
我大致上是，犧牲老鼠，取出心臟，拿去-20度冰箱冰約20min,
同時用37度C水浴槽，warm 1% TTC (用深色的eppendorf)
然後把心臟從-20度C冰箱拿出，用刀片和模具切成約 1mm 一片
約6-8片，不一定
然後丟到剛剛warm的TTC solution, 等15min in 37度C水浴槽
15min後拿出來，
其實如果有pale region(cell death)就看的到白白的區域了
再丟進10% formalin, 固定
我和這篇paper的不同點，
paper的作者好像有用cling film包心臟丟到eppendorf
再拿去冰在-20度，我則是直接丟進eppendorf裡就拿去冰了
哀，有人拿經驗分享一下，該怎麼做嗎?
連wildtype都做不穩，實在是做不下去了
還是因為動脈位置比較深的，所以我下針要更深一點???
實在搞不清楚問題在哪?
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