[求救] 請教關於蛋白表現量的實驗問題

看板Biotech (生命科學)作者 (皇上 您害的小八好苦啊)時間12年前 (2013/09/23 02:07), 編輯推噓3(307)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/1
請教版上的各位大大: 小弟另一個實驗是要觀察中草藥對於基因表現量的差異 目前是打算利用q-pcr來觀測結果 但是小弟對於pcr實在是沒有很大的自信 (之前clonning瘋狂失敗的後遺症) 想請問大家設計primer都是用什麼程式設計的呢? 選擇序列的考量點又有哪些?是將基因序列全部貼上程式去做設計嗎? 最後想請教用ELISA kit 會不會比較快或是方便(準確率會有影響嗎)? 或是有其他方法可以得出結果 請大大不吝指教 ps.老闆不准我用 western blot ><" -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 42.70.238.242

09/23 02:09, , 1F
可以用vector NTI,或者是網路上有專門設計qpcr引子
09/23 02:09, 1F

09/23 02:11, , 2F
的程式,如果要跨intron要看你的基因有沒有解過結構
09/23 02:11, 2F

09/23 10:56, , 3F
Roche有軟體可以設計 不過最好搭配Taqman的mixture使用
09/23 10:56, 3F

09/23 10:57, , 4F
可以用LPS 刺激細胞分泌cytokine再收medium來測
09/23 10:57, 4F

09/23 10:58, , 5F
但你養的細胞會不會分泌cytokine也要查一查
09/23 10:58, 5F

09/23 16:07, , 6F
RNA不能代表protein量 要不要講一下為什麼不准western
09/23 16:07, 6F

09/24 05:40, , 7F
我想不同方法看得點跟問的問題還是差距
09/24 05:40, 7F

09/24 05:40, , 8F
你必須針對你的問題去做實驗,並說服你的老闆
09/24 05:40, 8F

09/25 11:22, , 9F
老闆覺得western很麻煩= =
09/25 11:22, 9F

09/25 22:51, , 10F
囧...連western都嫌麻煩....那還能做什麼....
09/25 22:51, 10F
文章代碼(AID): #1IFp74p8 (Biotech)
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