[求救] 買來的蛋白質(CYP17A1)沒有heme...
各位好,小弟不才為化學系學生。之前跟生技廠定了一條重組蛋白想做ligand binding titration的實驗。該蛋白質是細胞色素P450 17A1 ,ligand會binding 在蛋白質中heme上,但是買來的蛋白質,實驗上一直測不到heme UV的訊號,追問廠商之後才知道他們在用大腸桿菌的表達時,沒有加ALA,所以合成蛋白質根本沒heme,……由於蛋白很貴不可能重買,該實驗又不得不做,因此想請問各位有可能用類似轉譯後修飾的方式加上heme嗎?例如加入過當量的heme至蛋白質中再離心純化…(目前文獻查到大多是在細胞階段導入)
不知到各位先見有什麽建議和想法呢?…真是十分苦惱啊QQ
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