[方法] 3.7% formaldehyde fix 細胞都飄光光

看板Biotech (生命科學)作者 (仁)時間12年前 (2013/11/06 16:23), 編輯推噓9(9011)
留言20則, 8人參與, 最新討論串1/1
如題 我用3.7% formaldehyde fix 細胞 要做 oil red O 染色 但是每到fix 步驟 細胞都會飄起來 尤其有treat 藥物組別更嚴重 但藥物濃度不能改 有辦法在方法上防止飄起來嗎? 已經超級小心用 pipet一格格慢慢吸慢慢吐了 還是會這樣 請各位大大解 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.38.179

11/06 16:52, , 1F
細胞種類?Plate廠牌?
11/06 16:52, 1F

11/06 16:52, , 2F
我們實驗室是發現293在corning上貼得很不好
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11/06 17:06, , 3F
Huh7 肝癌細胞
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11/07 02:27, , 4F
藥會讓細胞掛掉嗎???
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11/07 09:03, , 5F
可以先做coating再culture,看會不會改善.
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我們的經驗是293只會從一塊一塊的掉 變成像掀地毯一樣的掉
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我的建議是用貴一點的plate試試看
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\coating後
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用4%paraformaldehyde
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11/08 11:34, , 10F
4% parformaldehyde 會比較好喔?
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玻片先coating, wash的時候用P200把最前面3mm tip頭剪掉
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試試看吧 我都用4%parformaldehyde HEK293也不太會飄
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4% Paraformaldehyde +1
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4% PFA+1
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不過4%放太久有些抗體就會染不到惹
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不論哪種fixation~放太久都不行不是?!
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1%我可以放一陣子 :p
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我單純染脂質 沒有要下抗體
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11/13 21:20, , 19F
看染啥東東呀 PFA有時候會破壞某些protein活性
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11/25 07:09, , 20F
fix太久不好
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文章代碼(AID): #1IUVnctH (Biotech)
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