[求救] Western一抗震盪問題

看板Biotech (生命科學)作者 (ㄕㄠˊ)時間12年前 (2014/01/03 22:50), 編輯推噓2(208)
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大家好,不好意思,因為最近在做Western,因為要把一抗Reuse, 所以將一抗在4度中與membrane反應overnight,但由於實驗室的冰箱實在 沒辦法把shaker放進去,如果不震盪,這樣會影響抗體跟目標蛋白的結合嗎? 不知道有沒有板友也是直接放4度不震盪反應的。 謝謝大家! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 1.163.247.194

01/03 23:54, , 1F
理論上是不用震,但是如果你的液面沒有完全蓋過膜
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01/03 23:55, , 2F
要注意染色不均勻的問題。我們以前遇過wash的時候假裝很小心
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01/03 23:55, , 3F
故意把轉速調超低,結果押出來膜上就是一個圈圈
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01/04 00:19, , 4F
理論上不用4度,我幾乎所有的reuse一抗都一樣RT,包含phospho
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01/04 00:26, , 5F
感謝各位解答!!
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01/04 00:36, , 6F
牛奶放overnight RT不會壞掉嗎?
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01/04 00:43, , 7F
說到RT當然是1~2h阿,就像說到4度就會聯想到至少是0/N一樣
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01/04 02:10, , 8F
一抗室溫通常是快攻走法
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01/04 02:28, , 9F
覺得翹翹板那種最好用...
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01/05 19:23, , 10F
不震盪的話會造成1抗沉澱,如意染到non-spesific band
01/05 19:23, 10F
文章代碼(AID): #1IniucaC (Biotech)
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