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[求救] MTT assay 細胞缺一塊

看板Biotech (生命科學)作者 (我想要ㄉ幸福M)時間12年前 (2014/01/16 19:05), 編輯推噓2(2推 0噓 9→)
留言11則, 6人參與, 最新討論串1/1
跪求各位高手~ 我們的實驗是做primary cortical cell種在24 well裡 最近做MTT都會發現細胞有缺塊現象,如圖所示 http://ppt.cc/HpiK 最下面3格很明顯都有缺一塊變成空白的樣子(control組!!!) 上面兩格應該是正常的MTT樣子(加了細胞毒性的藥物) 我有記得10倍稀釋原液加入 我本來覺得是Pipette力道太大,但是並不是每一格都有 而且也不是每一次有會有空白出現(但是機率很高) 70%以上吧 容易空白的幾乎分佈在四週 中間比較不容易缺塊 想請問各位大大是哪裡出了問題~~ 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.31
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01/16 21:01, , 1F
plate coating沒做好吧 之前也用到一批這種的 馬上換掉
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永不採用y
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應該說plate底部的表面處理沒有做好
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01/16 21:17, , 4F
看起來只是操作的速度,那個空白像是你傾斜更換medium時乾掉
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01/16 21:19, , 5F
的上面區域,你suction方向跟空白是不是相反? multi容易這樣
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推
01/16 21:56, , 6F
感覺很像是被沖掉，PBS wash 的時候
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01/16 21:57, , 7F
跟別人借一個不同牌子的plate 試試 就知道了
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01/16 22:08, , 8F
我們之前就遇過了 vero cell還長到缺一塊咧
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01/17 16:56, , 9F
遇過 把MTT跟medium先混好再加入plate有改善
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推
01/22 21:48, , 10F
如果出現在四周很有可能是乾掉 四周乾的快
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03/25 15:33, , 11F
應該是PLATE的問題,之前也有看到過...一換批號就OKAY了
03/25 15:33, 11F
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