[討論] Lentiviral over-expression titer 問題
實驗室一直以來都使用 RNAi core 的pAS3W vector ,
但是常常做出來的cDNA over-expression lentivirus的 titer都很差,
相較於做shRNA knockdown的lentivirus, titer會降低超過十倍以上。
(有看過之前的討論串說 pAS3W 生產出來的 virus titer 好像效果不佳)
想請問各位前輩會有 做cDNA over expression的lentivirus, 但titer很差的問題嗎?
另外,
想再請問各位板上的前輩 習慣使用哪種over-expression vector來生產lentivirus
且效果(titer)又不錯的?
感謝各位的經驗分享與指教, 謝謝大家。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.55.238
※ 編輯: bcher 來自: 140.109.55.238 (01/23 22:12)
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回應各位前輩: 是的是的, 我們似乎也是有 cDNA長度與titer成反比 的現象,
塞進去的cDNA越長(約1500bps 或2000bps以上), titer就超級低
但如果cDNA長度大約在1000bps以下,甚至是500~600bps之間,
生產出來的virus titer就好很多。
如果各位前輩有 推薦 或 曾經使用過的 lentiviral over-expression vector
且 塞進1500bps至2000bps左右的cDNA後, virus titer 都還不錯的話,
我都願意盡力去買來試看看。
※ 編輯: bcher 來自: 140.109.55.238 (01/24 15:12)
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