[求救] BrdU染色體相關問題

看板Biotech (生命科學)作者 (GaryJ)時間10年前 (2015/09/17 17:07), 10年前編輯推噓2(2010)
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[幫朋友代PO] 想問一下有沒有人有做過老鼠的腦的海馬迴切片染BrdU和DCX的實驗? 我一開始染的時候BrdU和DCX都成功 但是BrdU一抗之前用完買了新的一管後BrdU就染不出來了 之後又跟廠商要了2管新的BrdU一抗和跟別的實驗室借的一管也是都染不出來 也作了以下驗證 1.本來以為是我自己有什麼疏失 但是找別人染也是一樣結果 加上以前都有染成功 所以排除了中間操作的步驟有疏失 2.拿之前有染成功過的同一批片用新的BrdU染也沒有東西 所以也排除是給老鼠打的BrdU有問題 3.染的片中DCX都沒有問題 只有BrdU是暗的 雖然目前得出結論是廠商的一抗出問題 但是已經換了2管和別人家的1管都沒有出來 感覺就很奇怪 不知道大家有沒有頭緒還有什麼東西我沒注意到或別的測試方法 還是說真的是廠商雷? 我染了10幾次了快崩潰了QAQ PS:新買的一抗的編號有跟之前用完的那管一樣的一管 也有換另一個編號的 然後是跟X晉買的 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.38.126.46 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1442480834.A.DAA.html

09/17 17:34, , 1F
補個照片
09/17 17:34, 1F

09/17 17:34, , 2F

09/17 17:34, , 3F

09/17 23:06, , 4F
可以參考這篇nature protocol
09/17 23:06, 4F
朋友表示會研究看看 再次感謝//

09/17 23:06, , 6F
t.2006.224.html
09/17 23:06, 6F

09/18 17:30, , 7F
你有記得先打洞(permeable)嗎?
09/18 17:30, 7F
朋友表示有先打洞了 ※ 編輯: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:14:53 ※ 編輯: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:15:32

09/19 00:56, , 8F
有denature DNA嗎?不然BrdU抗體會認不到
09/19 00:56, 8F

10/06 12:33, , 9F
用相同方式染,以前可以出來,新的染不出來,不同的只
10/06 12:33, 9F

10/06 12:33, , 10F
有抗體,那就是抗體出問題了阿,跟廠商反應比較快...
10/06 12:33, 10F

10/06 12:35, , 11F
另外抗體在運送過程的condition可能不一樣,之前也發生
10/06 12:35, 11F

10/06 12:35, , 12F
過這樣的情形也是請業務處理
10/06 12:35, 12F
文章代碼(AID): #1L-eB2sg (Biotech)
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