[討論] Oil red O 染色

看板Biotech (生命科學)作者grassshan (紙飛機啊歐歐踢欸死)時間10年前 (2015/08/14 12:20)推噓4(4推 0噓 14→)

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先感謝版上大大再之前轉漬提供的資訊！！特別一位寄站內給我詳細的大大… （手機lag 我不小心把信刪了沒備份到，沒辦法親自回信真的非常不好意思>_<）再者是這次遇到紅油染色跟配置的問題～我使用99% isopropylene 100ml + 0.5g oil red o 粉末（購自sigma) 過程是分次逐漸加入 isopropylene 緩慢加熱至 60～90℃ （泡的時候顏色太深，我就盡量把大顆粒泡散戳碎而已了…）我有放顆磁石在中間攪拌，稱著餘溫用濾紙過濾後，貯存於室溫之下我通常泡完後隔天再使用。但最近總覺得很奇怪的一點是，學長之前留下來的oil red o最少放超過3個月離心管內卻完全沒有雜質或是黏壁的樣子。但我前一天剛泡完，而且過濾好的到隔天，就會有很多顆粒出現… （所以我用之前都會再過濾啦～）只是好奇，大家的oil red o 泡完大概多久才出現沈澱顆粒的呢？而且我這樣 0.5%的oil red o濃度是不是會有影響啊… 再者是working solution的部分！我染色前沒有再加水配成working solution 直接30min 60℃熱完直接加到plate中染色然後烘箱60℃放置半小時再回收oil red o （我會reuse) 除了靠近外圍的一圈比較染不到，整格看起來的效果其實沒有很差。想問問配置成working solution的原因是？另外，我整個染oil red o的過程都不是在無菌操作臺中～包括前面用福馬林固定都沒有～昨天被學弟問可不可以放培養箱中固定… 我不知道啊啊啊啊啊（抱頭）當下只覺得外用福馬林進去培養箱有造成汙染的危險就先阻止他了。事後其實我還蠻困惑到底可不可行呢…？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.70.222.104 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1439526042.A.687.html

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ararthur

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