PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] ELISA sample加HCl 和NaOH

看板Biotech (生命科學)作者 (allthebest)時間10年前 (2015/09/01 17:29), 編輯推噓2(2推 0噓 15→)
留言17則, 4人參與, 最新討論串1/1
R&D的elisa kit 是要自己先手動coating的kit protocol裡面寫sample 要pretreat 在100ul sample+50 ul 1N HCl incubate10 min 再加45ul 1N NaOH 這個步驟是了為什麼？純粹矯正ph值嗎？ 因為我sample裡面標的蛋白的濃度已經很低了 加了HCl跟NaOH會更加稀釋掉了 所以想知道加酸跟鹼是不是必須的步驟 還是可以直接用原始sample測呢？謝謝大家 -- posted from android bbs reader on my HTC_M8x https://market.android.com/details?id=com.bbs.reader -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 117.19.241.188 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1441099756.A.764.html
推
09/01 18:34, , 1F
我們也是R&D system,也是自己coating,但是沒這個步驟
09/01 18:34, 1F
→
09/01 19:57, , 2F
蛤 是喔
09/01 19:57, 2F
→
09/01 19:58, , 3F
btw 是 R&D DuoSet 系列
09/01 19:58, 3F
推
09/01 20:44, , 4F
要看你的目標蛋白, 可能是有和其他component有interaction
09/01 20:44, 4F
→
09/01 20:45, , 5F
會影響到抗體辨認才用酸去破壞交互作用吧
09/01 20:45, 5F
→
09/02 07:00, , 6F
加1/2體積的1N強酸鹼下去，你不覺得這個很暴力嗎？
09/02 07:00, 6F
→
09/02 16:28, , 7F
由於他protocol沒有多加解釋原因 所以我也挺煩惱
09/02 16:28, 7F
→
09/02 16:31, , 8F
也沒有說不同類型的檢體是否有不同操作手段
09/02 16:31, 8F
→
09/02 16:37, , 9F
決定寫信問原廠比較快~~
09/02 16:37, 9F
→
09/02 16:59, , 10F
剛跟R&D 技術員livechat 他說如果原始測的出OD
09/02 16:59, 10F
→
09/02 17:00, , 11F
Ok 的話，不一定要加酸跟鹼
09/02 17:00, 11F
→
09/02 17:00, , 12F
我看了DuoSet kit的描述，看到它是為了使TGF-beta1成為免疫
09/02 17:00, 12F
→
09/02 17:01, , 13F
livechat還不錯不用等回信 只是對方打字好快..XD
09/02 17:01, 13F
→
09/02 17:02, , 14F
活化狀態，以使得抗體能辨認。所以，加酸加鹼下去，就是為了
09/02 17:02, 14F
→
09/02 17:03, , 15F
加酸破壞其三四級結構，曝露出epitope。然後加強鹼(有hepes)
09/02 17:03, 15F
→
09/02 17:05, , 16F
中和整個溶液，免得後來的抗原抗體後應没有效果。
09/02 17:05, 16F
→
09/02 17:06, , 17F
所以才會用暴力方式作用。
09/02 17:06, 17F
‣ 更多 allthebest 的文章
文章代碼(AID): #1LvM_iTa (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 allthebest 的文章
文章代碼(AID): #1LvM_iTa (Biotech)