[求救] western會有黑暗星雲出現

看板Biotech (生命科學)作者 (NEET)時間10年前 (2015/09/22 20:03), 編輯推噓5(503)
留言8則, 6人參與, 最新討論串1/1
http://tinyurl.com/ort2zx5 http://tinyurl.com/nrpayvk 這是我泡western常會看到的現象,某區域會完全沒訊號,背景和target都是。 我一抗是用夾鏈袋,blocking,二抗和ECL是加在塑膠盒中,有確定在shaker上 可以自由移動 從時間點上來分類有幾種可能 1.membrane在轉印前就有問題了,無法protein binding 2.blocking和1抗沒結合 3.2抗沒結合 4.ECL沒泡到 第一項,機率很低吧? 第二項,我覺得這種因素頂多沒有target,不會到連背景都消失 第三項....機率也不高,因為塑膠盒中的membrane可移動,應該都有泡到 第四項,我先把membrane丟到ECL盒子中,拿出來貼在盤子上,上面又繼續淋ECL蓋到滿 ,機率應該也不高 總之目前我想不通,想請問有人知道這原因是什麼嗎? -- 小黃小黃別生氣,明天帶妳去看戲。 我坐椅子妳坐地,我吃雞腿妳啃骨。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.137.85 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1442923412.A.D08.html

09/22 21:00, , 1F
1.請問用什麼blocking 2.WASH 次數 3.一二抗各泡在哪
09/22 21:00, 1F

09/22 23:54, , 2F
transfer完用Ponceau S染membrane確認第一項
09/22 23:54, 2F

09/22 23:55, , 3F
搞不好就是氣泡或其它問題導致transfer不完全
09/22 23:55, 3F

09/23 10:05, , 4F
1.transfer 沒密合或是膜和膠之間有東西 2. 手指摸到膜
09/23 10:05, 4F

09/26 22:57, , 5F
membrane存放多久了??? 你有用鑷子嗎?
09/26 22:57, 5F

09/29 20:57, , 6F
看起來像transfer時有氣泡,不像blocking失敗
09/29 20:57, 6F

10/12 00:05, , 7F
不過transfer失敗的話,應該還是會有背景值吧?lane和lane之
10/12 00:05, 7F

10/12 00:06, , 8F
間的亮度,那邊也太黑了吧?
10/12 00:06, 8F
文章代碼(AID): #1M0KEKq8 (Biotech)
文章代碼(AID): #1M0KEKq8 (Biotech)