[求救] trypsin 回溶流程

看板Biotech (生命科學)作者 (因風飛過薔薇)時間10年前 (2015/09/24 10:40), 10年前編輯推噓3(308)
留言11則, 5人參與, 最新討論串1/1
各位好 今天突然發現實驗室裡面大家 回溶trypsin的方法很不一致XD 我們實驗室是在做蛋白質鑑定的 因此需要用trypsin把蛋白質切成胜肽 1)有的方法是 把trypsin從-20度取出,加buffer後放在冰裡靜置20~40分鐘再使用 2)有的方法是 把trypsin從-20度取出,加buffer後直接在室溫下放20分鐘後開始使用 請問~~ 上述這兩種方式有差很多嗎@@ 後者會讓trypsin失去活性嗎? 還是其實兩者差異不大呢 請前輩們指教~~ 謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.122.142.13 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1443062427.A.156.html

09/24 11:35, , 1F
多少會。個人覺得重複解凍比較傷,另外trypsin作用最
09/24 11:35, 1F

09/24 11:36, , 2F
好是在37度吧,室溫20分應該是還好。是說是解凍還是回
09/24 11:36, 2F

09/24 11:36, , 3F
溶??..
09/24 11:36, 3F

09/24 11:38, , 4F
結論是個人認為差異不大,但是硬要比2應該會傷一點。
09/24 11:38, 4F

09/24 11:38, , 5F
個人意見有錯請指正!謝謝
09/24 11:38, 5F
謝謝ceasar大的回覆!!! 上述的狀況是要把粉狀的trypsin加buffer成溶液的狀況 ※ 編輯: rusly (140.122.136.115), 09/24/2015 12:09:29

09/27 10:31, , 6F
粉狀的 trypsin 我都存在4'C 耶…
09/27 10:31, 6F

10/04 10:43, , 7F
其實....我都用手握住加溫....(不要被學長姐發現的話X
10/04 10:43, 7F

10/04 10:43, , 8F
D)
10/04 10:43, 8F

10/17 10:10, , 9F
本lab 粉也是存放在4度C,還是你家買的是-20保存?
10/17 10:10, 9F

10/17 10:11, , 10F
不的過我指的是cell culture用的
10/17 10:11, 10F

10/17 20:16, , 11F
我們是保存在-20度喔!
10/17 20:16, 11F
文章代碼(AID): #1M0sAR5M (Biotech)
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