[求救] PCR蒸發

看板Biotech (生命科學)作者 (Anthony Joshua)時間10年前 (2015/10/15 11:25), 10年前編輯推噓3(3015)
留言18則, 7人參與, 最新討論串1/1
是的本魯悲慘的研究生 研究的題目是做出一台PCR機器 跑完溫度循環 在監測SYBR Green的螢光 但目前卡在 檢體滴入我設計的卡匣 放到機器加熱後 檢體整個蒸發乾 也試過加入礦物油(mineral oil) 檢體20ul+10ul的礦物油 但依然還是蒸發殆盡 我查過文獻 礦物油、甘油、石蠟油 都有人使用來防止蒸發 這三種有什麼差異性嗎? 有沒有人可以提供一些建議 救救我這碩2.5的可憐延畢生 感謝萬分!!! 附上我的卡匣設計 : http://imgur.com/71E2IKm
以壓克力當基材 用雷射切割出圓孔 再使用雙面膠將 鋁箔紙黏住當成底部 檢體注入後 再透過雙面膠將 透明投影片黏住 使他整個密封 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.116.78.236 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1444879502.A.460.html

10/15 11:43, , 1F
1. 上蓋有無加熱 2.密封氣密性如
10/15 11:43, 1F
1.上蓋無加熱 2.氣密性應該是還可以 因為我卡匣滴入檢體密封後 放了兩個禮拜以上 裡面的檢體都還在

10/15 11:48, , 2F
礦物油是舊式機型會用到的,石蠟油我不知道
10/15 11:48, 2F

10/15 11:50, , 3F
甘油在你檢體就內含,加入與水互容稀釋體積,更抑制酵素活性
10/15 11:50, 3F
※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/15/2015 15:45:35

10/15 20:51, , 4F
材料加熱過後 膨脹溢出?
10/15 20:51, 4F

10/15 20:52, , 5F
先把有顏色液體裝入卡夾 丟到95度C熱水環境做檢測吧
10/15 20:52, 5F

10/15 20:52, , 6F
檢查是否會液體溢出
10/15 20:52, 6F

10/15 22:12, , 7F
熱漲冷縮的因素考慮進去沒? 感覺你上下的強度不夠...
10/15 22:12, 7F

10/15 23:47, , 8F
基本上做qPCR的管子蓋子密合度要非常高,我認為是密合
10/15 23:47, 8F

10/15 23:47, , 9F
度不夠才蒸發的。
10/15 23:47, 9F

10/16 00:44, , 10F
你的雙面膠加碰到油之後加熱到接近100度C時會怎樣?
10/16 00:44, 10F

10/16 00:45, , 11F
你的氣密性設定有放著加熱兩星期嗎?
10/16 00:45, 11F

10/16 00:45, , 12F
還有反覆地昇降溫對於雙面膠的黏性有没有什麼影響?
10/16 00:45, 12F

10/16 00:50, , 13F
個人覺得P大的建議很好用,有做過類似的檢測嗎?
10/16 00:50, 13F

10/16 00:51, , 14F
你的設計似乎是不用微量管的。那污染問題要怎麼解決?
10/16 00:51, 14F

10/16 00:53, , 15F
還是我誤會了?如果是我誤會,我會覺得微量管有問題。
10/16 00:53, 15F

10/16 00:56, , 16F
另外有没有可能會是加熱太快,讓樣本衝出封鎖?XDD
10/16 00:56, 16F
雙面膠可耐熱到135度 我設計非微量管 是半徑2mm的圓 我覺得是我壓克力熱變形後使得密合度 變差甚至有縫隙

10/19 02:27, , 17F
密合度不夠~~上周有做狀況跟你一樣~~換上膜之後就解決了~
10/19 02:27, 17F
請問可以分享一下你用什麼上膜嗎? 或是詳細分享你的專案做個討論 ※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/20/2015 13:10:19

10/20 20:31, , 18F
那雙面膠在碰到油的狀態下,加熱時會穩定嗎?
10/20 20:31, 18F
我有試過P大的方法 卡匣裡滴20ul墨水+10ul礦物油然後密封 分別丟在常溫水裡 與100度的水裡 都沒有溢出的現象 我覺得問題出在我加熱只有單面 導致有溫差 使得卡匣熱膨脹彎曲 破壞了我原本的密閉性 ※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/21/2015 15:00:44
文章代碼(AID): #1M7noEHW (Biotech)
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