[討論] HPLC更改條件會影響積分面積嗎?

看板Biotech (生命科學)作者Peetu (Peetu)時間10年前 (2015/10/27 23:44)推噓1(1推 0噓 0→)

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今天跑HPLC時，打了標準品 (天然活性物的標準品) 發現更改分析條件，例如MP比例、溫度，都不太會影響積分面積的數值只有更改流速時，積分面積會變動 (所有條件下都不更動，只有調流速) 例如原本流速為1.0，分析出來的數值是10000 變更為0.5，分析出來的數值就會變成20000 想討論一下這是什麼原因造成的呢? 我的想法是: 一般來說純度高的單一sample打到column後，就會集中在一點按照與column和MP的分配系數，來決定RT，一起沖出column後，由偵測器讀出數值 k = stationary phase/mobile phase，因此降低流速只是影響k值變小而已，提高RT 但應該不會影響偵測器的判讀，因為sample是一起被沖出column 因為column容積是相同的，不會因為流速提高，導致column內體積增加，進而稀釋掉sample吧? HPLC: waters column: RP C18 5uM MP: ACN/Formic acid/water detector: PDA -- → hsnuconan:這世界上只有10種人懂二進位的和不懂二進位的 10/27 00:13 → Metallicat:hsnuconan的數學老師XDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDD 10/27 00:13 → Metallicat:hsnuconan會被作成簽名檔XDDDDD笑死 10/27 00:14 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 114.35.44.89 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1445960667.A.F83.html