Re: [求救] ELISA稀釋幾倍都OD值差不多
以下只以你們所使用的這支Ab來源為例子
並非完全只所有Mybiosource的產品
關於這個kit所使用的CYP3A2 antibody
其host是rabbit,immunogen是rat CYP3A2 C-ter
應該與Mybiosource網頁上的anti-CYP3A2 Ab (MBS534856)相同
也就是MBS534856是賣你抗體,MBS9310896則是賣你ELISA kit
ELISA kit操作的部分
我搜尋一下我有興趣的基因,全部都出ELISA,連沒幾篇paper的基因也有
其中,多數的manual都是under request
少數有PDF的,每篇內容說明除了適用substrate與物種會有差異(而且還highlight)
剩下的內容是跟你的CYP3A2只是copy/paste
我懷疑花心思研究這個protocol的價值會有多少
你可以試試看其他ELISA kit manual是不是真的如此
類似的例子就像是SantaCruz抗體
不管哪一支都建議你用1:100~1:1000,濃度不是0.1就是0.2ug/ul
所以好像沒遇過有人會把它當真
抗體的部分
前面提到該抗體是rabbit anti-rat CYP3A2 c-ter
去Biocompare看一下,總共有約8家共十幾支CYP3A2抗體
有趣的是,除了Merck EMD的immunogen是human,怎麼其他都是rabbit anti-rat?
是因為rat CPY3A2很重要? 還是每家的抗體其實是同一來源?
而且immunogen都只寫CYP3A2 c-ter,好巧
然後以下是這幾家rabbit anti-CYP3A2的價格,很不正式的列表 (100ul, USD)
antibodies-online 589+45(shipping)
Fitzgerald 415+26(shipping)
Lifespan 700
Mybiosource 535
USBiological (需註冊)
Abcam 370 (25ul only)
Enzo 328 (103 for 25ul)
假使這支抗體是各家自己製造的,選哪一家還可以看品牌信任度
如果是同一來源,想也知道不該當冤大頭阿
順便提一下,或許常買的話也會知道
某些公司的抗體存在價差,往往跟上述現象有關
回到你的問題
我對抗體比較熟,ELISA則是沒碰過
對於這抗體是否好用,是否能用在tissue lysate等問題若無法確認
就算Mybiosource真的有實驗室幫你們做好plate coating
還提供synthetic peptide當PTC
關鍵還是在這支抗體在rat tissue有沒有效
至少上面幾家抗體商也都沒有秀data來佐證阿
以上是我的看法,只是實驗操作還是沒幫到忙
※ 編輯: blence (140.109.40.29), 12/16/2015 20:13:33
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