Re: [求救] ELISA稀釋幾倍都OD值差不多

看板Biotech (生命科學)作者 ( )時間9年前 (2015/12/16 20:13), 9年前編輯推噓4(4016)
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以下只以你們所使用的這支Ab來源為例子 並非完全只所有Mybiosource的產品 關於這個kit所使用的CYP3A2 antibody 其host是rabbit,immunogen是rat CYP3A2 C-ter 應該與Mybiosource網頁上的anti-CYP3A2 Ab (MBS534856)相同 也就是MBS534856是賣你抗體,MBS9310896則是賣你ELISA kit ELISA kit操作的部分 我搜尋一下我有興趣的基因,全部都出ELISA,連沒幾篇paper的基因也有 其中,多數的manual都是under request 少數有PDF的,每篇內容說明除了適用substrate與物種會有差異(而且還highlight) 剩下的內容是跟你的CYP3A2只是copy/paste 我懷疑花心思研究這個protocol的價值會有多少 你可以試試看其他ELISA kit manual是不是真的如此 類似的例子就像是SantaCruz抗體 不管哪一支都建議你用1:100~1:1000,濃度不是0.1就是0.2ug/ul 所以好像沒遇過有人會把它當真 抗體的部分 前面提到該抗體是rabbit anti-rat CYP3A2 c-ter 去Biocompare看一下,總共有約8家共十幾支CYP3A2抗體 有趣的是,除了Merck EMD的immunogen是human,怎麼其他都是rabbit anti-rat? 是因為rat CPY3A2很重要? 還是每家的抗體其實是同一來源? 而且immunogen都只寫CYP3A2 c-ter,好巧 然後以下是這幾家rabbit anti-CYP3A2的價格,很不正式的列表 (100ul, USD) antibodies-online 589+45(shipping) Fitzgerald 415+26(shipping) Lifespan 700 Mybiosource 535 USBiological (需註冊) Abcam 370 (25ul only) Enzo 328 (103 for 25ul) 假使這支抗體是各家自己製造的,選哪一家還可以看品牌信任度 如果是同一來源,想也知道不該當冤大頭阿 順便提一下,或許常買的話也會知道 某些公司的抗體存在價差,往往跟上述現象有關 回到你的問題 我對抗體比較熟,ELISA則是沒碰過 對於這抗體是否好用,是否能用在tissue lysate等問題若無法確認 就算Mybiosource真的有實驗室幫你們做好plate coating 還提供synthetic peptide當PTC 關鍵還是在這支抗體在rat tissue有沒有效 至少上面幾家抗體商也都沒有秀data來佐證阿 以上是我的看法,只是實驗操作還是沒幫到忙 ※ 編輯: blence (140.109.40.29), 12/16/2015 20:13:33

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非常感謝你的看法,我覺得很有幫助!關於抗體部分,
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以前是購買merck,但它今年抗體說QC沒過,打算停產
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不賣,所以如果是以上幾間廠牌,你會推薦哪個呢?還
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是真的都是同一來源呢
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基本上是同一來源,現在賣抗體常常這樣
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以為有很多選擇,原來怎麼選都是同一來源
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都是rat會不會是因為3A2只在rat中有,其他物種沒有
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,有的是相似的subfamily,像是人類為3A4,但sequen
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ce和3A2有71%相似,所以才會看到都是以rat來做,但
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如果是這樣,我同樣使用應該要測得到才對,畢竟來源
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都是rat了,且如果真的抗體來源都一樣,扣除已經停
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產的merck,這樣我不管選擇哪個kit,如果抗體同家,
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那是不是都一樣做不出來,可以這樣說嗎?
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當然不是阿,用human打的抗體,也常常連human lysate認不到
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你查一下MBS9413770, ab119330, LS-C205193, 20R-2736
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ABIN2034547, ProSci 79-727
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都是認MELK的抗體,不同公司怎麼放的figure都一樣
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是因為大家都做的一樣,還是現在抗體都同一來源?不難分辨
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私信請教你抗體問題,謝謝!!
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12/27 01:24, , 20F
聖誕老公公躺著也中槍... 射死他QwQ
12/27 01:24, 20F
文章代碼(AID): #1MSLLROd (Biotech)
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