[方法] 冷凍切片IF要Heat-induced retrieval嘛?

看板Biotech (生命科學)作者 (how to give name)時間9年前 (2016/01/05 22:26), 編輯推噓3(303)
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我最近在染pERK in mouse brain tissue (這隻抗體,確定在paraffin section染IHC,可以染) slides直接染,沒訊號, 試了proteinase K, EDTA,retrieval都染不出來, 後來查到了一篇2015年的journal of neuroscience 它是用citrate buffer, pH 6.0, for 10 min 可是我一般做paraffin section的都會把buffer加熱到滾 在放下去煮20分鐘, 請問那cryosection要嘛? 看版上以前的討論,過強的retrieval會造成false positive嘛? 謝謝回答... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.220.139 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1452004014.A.411.html

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抗體比例濃一點試試呢?
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01/06 12:43, , 2F
citrate 跟前面retrieval有啥不同?
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01/06 12:44, , 3F
烘片時間和fixation時間會不會影響這蛋白
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01/06 20:07, , 4F
我常染鼠腦冷凍切片的pERK,這抗體不用retrieval
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Slides直接染本來變因就大,用free floating吧
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01/06 22:30, , 6F
了解,感謝各位,我試試
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文章代碼(AID): #1MYzAkGH (Biotech)
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