[求救] 細胞長起來幾天又莫名死掉
為了製作單株抗體，而在學校的某一棟系館篩選出一批融合瘤細胞株
凍存在-80約一個月之後，利用乾冰帶回自己的系館。
在放進液態氮前，想說解凍確認一下存活率
但解凍細胞就一直失敗
細胞剛解完看起來非常圓
隔天可以看到約有三成細胞貼附，其他細胞多半死亡
換掉medium之後，再隔天可以看到有貼的細胞都有分裂
就在有點放心的時候，隔天就會突然全部死光，毫無預警
因為這批細胞很重要，我們特地買cell banker凍存液，也利用漸凍盒
每管細胞量都至少有 2x10^6 cells/mL
解凍細胞是直接把凍管放到37度C水浴一分鐘，補 medium 到 5mL
300g 離心 8 分鐘，再用新的 medium 回溶，隔天也一定會換 medium
用同一罐 medium 養細胞的老師養的有活
培養箱裡的其他細胞也都有活
就只有我的細胞沒有活......
請問有人有發生類似的情況嗎?
如果是一開始就凍壞，或是細胞在運輸的過程中升溫導致冰晶出現，
那細胞還會生長分裂嗎？
總是先分裂一陣子，讓我覺得沒事之後馬上死光光啊！！！！
還是有可能會是汙染嗎？
（但medium沒有變色、混濁等現象，顯微鏡下看也沒有不明物體)
拜託大家了
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