[求救] E.coli表現R跟E表現量差異?
原PO最近在利用大腸桿菌表現重組蛋
白，遇到一點問題。
主要是利用pet22b載體在BL21菌株中，
分別表現兩段胺基酸序列，兩段序列高度
重複，除了將第一段裡面所有的E，
glutamate換成R，arginine以外。培養在
LB裡，以相同表現條件去表現OD600=0.6
時IPTG加至1mM誘導兩個小時，兩個蛋
白表現量卻差很多，有E的蛋白Band超
厚，有R的蛋白幾乎沒有表現。
原PO有去查一下，大腸桿菌合成R的
pathway主要是藉由E來產生(不確定是不
是真的，所以有E的蛋白表現量比R多還可
以接受，但R蛋白完全不表現卻不知道該
怎麼辦，有試過低溫拉長時間卻也沒什麼
用。
有去定序過了DNA序列是對的，同時E跟R
都是在所有codon裡表現機率最高的
codon，所以應該不是DNA序列的問題。
不知道各位大大有什麼建議? 像是在培養
液裡面添加什麼會比較好還是換個培養液
之類的?
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