[方法] starvation

看板Biotech (生命科學)作者NCKUM (成功大學醫學)時間9年前 (2016/07/31 00:31)推噓1(1推 0噓 12→)

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我實驗是為了看knockdown這gene A是不是不會幫助protein B釋放出到medium 再利用ELISA測某個protein B 我之前有測過control和knockdown我的gene A 在starvation 24h下control測到我想看到的protein B比knockdown高而在沒starvation也是但是control比knockdwon在starvation非常明顯差異而沒starvation下只差異一點點請問我現在要做protein B的signal 我要比較 control 比knockdown 下游signal 和在kncokdown組加回protein B 也就是 control & knockdown & knockdown+protein B 我實驗設計是早上先種細胞晚上starvation 隔天早上就直接加protein B不換medium (因為換掉他釋放出來的protein B就被我換掉還是再換一次新的serum-free medium?) 24小時候直接收lysis 還是有更好的方法感謝 -- ※ 編輯: NCKUM (140.116.191.120), 07/31/2016 00:32:49 ※ 編輯: NCKUM (140.116.191.120), 07/31/2016 08:19:36

推

tynse71864

07/31 18:48, , 1^F

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tynse71864

07/31 18:48, , 2^F

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1ml 加8ul 在6-well

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07/31 18:51, , 3^F

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tynse71864

07/31 18:51, , 4^F

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抱歉沒說清楚因為我看到在starvation時候 control 比knockdown組的function assay 和一些function protein很明顯差異在knockdwown這組 protein B 無法被釋放出來而在ELISA測到或許是protein B影響function, knockdwon geneA 無法釋出protein B 所以就想在knockdown組加protein B 回來來對比knockdown alone組想說在starvation環境下加回protein B (protein B加下去開始算24小時) 但是前天starvation時間在加protein B 不換medium 這樣算好像超過24小時(還是沒差?)