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[求救] transwell做invasion assay

看板Biotech (生命科學)作者 (我不是yahoo)時間9年前 (2016/08/03 15:24), 9年前編輯推噓0(0推 0噓 9→)
留言9則, 1人參與, 最新討論串1/1
各位高手好～ 我最近在用millipore的8um孔徑transwell做invasion的實驗 上面coating 50ul的1:1稀釋matrigel 使用的是BxPC3和H441兩種細胞 分別在48和72小時收實驗 想請問各位大大 在清除matrigel的時候 可以直接用suction吸掉嗎？ 因為很擔心穿過去的細胞又會被吸回去甚至被吸到不見 但是用棉花棒擦的話耗時而且很難擦乾淨 偶爾還有棉絮 甚至一個不小心就把膜給戳破 不知道有沒有兼顧效率和品質的方法>< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.49.176 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1470209064.A.8B3.html
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08/03 18:48, , 1F
我是比較常做migration 印象中1.是coating完37度等30分鐘後
08/03 18:48, 1F
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08/03 18:51, , 2F
就吸掉 再加細胞 2.棉花棒會先稍微拉鬆沾濕 然後我會準備2
08/03 18:51, 2F
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08/03 18:52, , 3F
種size的棉花棒 粗的(一般掏耳朵的)清大範圍 細的清細部
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08/03 18:53, , 4F
然後就是小心囉
08/03 18:53, 4F
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08/03 18:55, , 5F
invasion比較不常做 所以1不是很確定
08/03 18:55, 5F
嗯嗯謝謝你～ 但有點好奇為什麼你步驟1 coating完又要吸掉呢？是只要保留非常少的 matrigel嗎？我migration都是用wound healing，沒看過你的作法有點好奇～ ※ 編輯: yaboo (140.112.212.175), 08/05/2016 00:48:14
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08/05 10:05, , 6F
只有膜上有就好，我是靠著transwell的邊邊吸 而且我的稀釋
08/05 10:05, 6F
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08/05 10:06, , 7F
比例是1:10 所以它還是很水樣
08/05 10:06, 7F
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08/05 10:07, , 8F
migration就只差沒coation而已 跟wound healing的migration
08/05 10:07, 8F
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08/05 10:07, , 9F
可以看不同東西
08/05 10:07, 9F
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