[求救] 羥脯胺酸濃度測定
大家好
小弟最近要測定膠原蛋白的濃度,膠原來源為sigma購買之膠原蛋白溶液。
所使用的方式為sigma所購買的hydroxyproline assay。
其中一個步驟是先將膠原蛋白加上12N的HCl於120oC下酸化三小時,
再來置於60oC讓HCl揮發。
But,我使用kit規定的PTFE-lined cap以及瓶子,於120oC下酸化三小時還是會揮發。
想請教有做過的先進這樣的情況是正常的嗎?由於他的第二步驟是在60oC讓HCl揮發,
所以我硬做了一次,不管他在120oC揮發了多少,經過60oC處理後回溶,發現幾乎測不到
hydroxyproline的存在。溫度控制皆在烘箱下進行
懇請有做過的大大給予指點QQ
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