[求救] plasmid extraction quality膠圖判讀
之前做了好幾次plasmid extraction，
然後將沒經過限制酶剪切的plasmid去跑膠做quality check，
發現膠圖總會有3條band。
膠圖如連結:http://goo.gl/wdfQv9
查了板上先前的舊文及估狗資料，
plasmid在跑膠會有circular single stranded、supercoiled、covalently bonded、
linear及nicked 5種form (條帶)。
但為甚麼每次做出來的膠圖只看到3個band? (Q1)
此三條band 由上至下是否分別代表nicked、linear及supercoiled (Q2)
此外為何沒有限制酶剪切的plasmid會有linear 及nicked form存在? (Q3)
另外，看網路上的plasmid膠圖
supercoiled form 與其他form 的距離很明顯都會拉很開，
但我跑出來的膠(1% agarose gel, 100 V, 400 mA, run 30 min)
第一條和第二條band距離相當接近 (plasmid大小約為3.4 Kb)
讓我相當困惑第一條band到底是不是supercoiled form? (Q4)
以上4個問題還請大加麻煩幫我開釋解惑一下!
如果認知上有錯也麻煩糾正，
謝謝!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 61.216.40.23
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1471957752.A.CA2.html
→
08/23 21:48, , 1F
08/23 21:48, 1F
推
08/23 22:28, , 2F
08/23 22:28, 2F
→
08/23 22:28, , 3F
08/23 22:28, 3F
推
08/24 05:57, , 4F
08/24 05:57, 4F
→
08/24 06:05, , 5F
08/24 06:05, 5F
※ 編輯: fishg1216 (61.216.40.221), 08/24/2016 21:27:06
推
08/25 05:13, , 6F
08/25 05:13, 6F
→
08/25 05:13, , 7F
08/25 05:13, 7F
→
08/25 07:33, , 8F
08/25 07:33, 8F
→
08/25 07:39, , 9F
08/25 07:39, 9F
→
08/25 07:56, , 10F
08/25 07:56, 10F
→
08/25 08:00, , 11F
08/25 08:00, 11F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章