[求救] western blot 重下不同二抗
各位大大早安,手機發文抱歉
小弟想問的是
小弟用anti his-tag的抗體偵測sf9細胞株
沒有進行蛋白質定量,大約使用90% T75的細胞數
使用BCIP+NBT呈色
有加長呈色時間,但是完全沒有band出現
但是聽說正常來說細胞做anti his-tag呈色都會有東西跑出來(學長姐之前做也是說會有
一些些雜band)
猜測二抗本身有些問題
原因是二抗上次用到剩下約3ul
感覺還可以做個幾次
但沒想到下次做實驗就乾了
小弟拿去稍微離心結果跑出大概30ul...
可能都是水了!?
想問說我這片膜還可以洗ㄧ洗再下一次新的二抗嗎
因為如果照理論的話我的樣品蛋白跟一抗還卡在膜上
不知道有沒有大大這樣做過
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