[求救] 關於利用抗性基因篩選轉型珠的問題
各位前輩好
小弟最近在篩選轉型珠時不時會遇到一個問題
在此提出望有類似經驗者可以一起討論、解答
我將目標基因
以兩個序列不同的切位
放在帶有抗性基因的質體上
並轉型後藉由抗生素培養基進行篩選
但在含有抗生素的培養基上得到菌落後
對 14 顆菌落 Colony PCR 都沒有目標基因(Positive control 顯示 PCR 沒有問題)
同時我有做一個未放質體的轉型 Negative control 在抗生素培養基上沒有菌落,所以抗生素應該沒有問題
那就奇怪了@@
請問有人有相關經驗嗎
謝謝
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