[求救] HPLC tailing的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (根本科科)時間9年前 (2016/10/06 04:56), 9年前編輯推噓2(201)
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大家好,目前小弟在peptides合成的公司上班 今天遇到UPLC在主峰後面有類似tailing(or back shoulder)的問題,當然也有可能是back impurities 我之前大學專題跟研究所都是以研究有機合成為主 HPLC對我來說是完全新的東西目前慢慢在學 先假設這個情況是tailing來說 我的想法是利用ammonium acetate去過一下柱子之後在用95%水洗一下柱子之後再去跑samples 會這樣想是因為我猜NH4+也許可以binding在Si-O-上可以減少tailing的問題 不曉得這樣的觀念是不是有錯誤?? 主管他們是決定用pH小於12濃度的的NaOH是洗柱子 結果確實是解決tailing的問題 想請教一下用鹼去洗柱子這樣是甚麼想法為什麼可以解決tailing的問題? (我們公司很常利用1%TFA and 1g/L NaOH去洗prep HPLC) 非常感謝指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 174.63.200.228 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1475700963.A.E08.html ※ 編輯: ivan1209 (174.63.200.228), 10/06/2016 05:01:00

10/07 16:00, , 1F
主要不是bind到column而是留在column上的渣渣 OH-洗渣
10/07 16:00, 1F
那請問為什麼那些髒東西會造成拖尾呢? 如果很多東西應該卡住應該會阻塞變成fronting? ※ 編輯: ivan1209 (174.63.200.228), 10/07/2016 20:04:29

10/08 19:19, , 2F
不是阻塞而是你的東西會被retain在渣渣上吧
10/08 19:19, 2F

10/08 20:53, , 3F
了解! 謝謝你
10/08 20:53, 3F
文章代碼(AID): #1NzMZZu8 (Biotech)
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